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基于上海一恒人工气候培养箱的34个烟草品种萌发期耐盐性评价

[导读]为明确不同烟草品种的耐盐程度、选育出耐盐烟草品种,采用上海一恒人工气候箱培养,通过主成分分析和聚类分析对不同烟草品种萌发期的耐盐性进行了综合评价。结果表明,盐胁迫导致K326根长下降50%的浓度(EC50)为150 mmol/L NaCl。

为明确不同烟草品种的耐盐程度、选育出耐盐烟草品种,采用人工气候箱培养,通过主成分分析和聚类分析对不同烟草品种萌发期的耐盐性进行了综合评价。结果表明,盐胁迫导致K326根长下降50%的浓度(EC50)为150 mmol/L NaCl。用该浓度盐胁迫处理后,34个烟草品种间的发芽势、发芽率、萌发指数、活力指数和根长等指标差异显著。经主成分分析和欧式距离聚类,将试验的烟草品种划分为高耐盐、较耐盐、较敏感和高敏感4个等级。耐盐品种为香料烟巴斯玛;较耐盐的品种为烤烟K326、云烟87,白肋烟DS26、va1061和va509;较敏感品种为烤烟Spt168、中烟100、NC89、秦烟97,白肋烟KY907、TN86、va1048、TN90,香料烟沙姆逊和伊兹密尔;高敏感品种为烤烟NC82、K399、吉烟9号、RG11、秦烟96、NC55、NC567、NC95、遵烟6号、K394、岩烟97、K358、红花大金元、Hicks、K346、coker176、CV87和白肋烟va1052。

世界粮农组织在2016年的报告中提出,土壤盐渍化、有限的耕地面积以及突发的自然灾害使现代农业的发展面临着前所未有的挑战[1]。目前世界盐渍土壤面积约为1.00×1010hm2,中国的盐渍土壤约有3.67×107hm2,我国耕地的次生盐渍土壤面积约为9.20×106hm2,占耕地总面积的6.6%[2]。对我国植烟土壤的研究也发现,部分植烟土壤已出现土壤盐渍化现象。赵莉[3]对湖南植烟土壤盐分调查发现,湖南地区植烟土壤盐分表聚现象严重,从而影响烟草的正常生长以及调制后的烟叶质量。马静等[4]对洛阳典型植烟土壤盐分含量进行分析后认为,洛阳部分植烟土壤已经表现出轻度盐渍化现象。目前,土壤盐渍化的成因大多是由生产中不合理的耕作方式、灌溉、施肥等农业措施带来的,并成为影响农业生产较严重的非生物胁迫之一[5]。

在植物生长过程中,种子萌发期是对外界环境最敏感的时期,也是研究植物耐盐性的重要时期[6]。种子萌发期的耐盐情况可在一定程度上反映该物种的耐盐性[7],许多植物均以萌发期的耐盐性进行种质的抗盐胁迫评价。近年来,不同学者对花生[8]、谷子[9]、粳稻[10]等作物进行了种子萌发期的耐盐性调查和研究,田蕾等[10]采用相对发芽势、相对发芽率、发芽指数和相对盐害率作为粳稻耐盐性指标,并对64份粳稻种质进行了耐盐性评价;李明雨等[11]通过主成分分析后选择相对发芽率、相对发芽势和相对活力指数等作为衡量品种耐盐性的相关指标;张志飞等[12]采用主成分分析法计算分析后选择相对活力指数和相对发芽率对66份白三叶种质进行耐盐性评价。在烟草品种的耐盐性研究中,龚理[13]对不同浓度NaCl溶液胁迫下7个品种不同生长时期的耐受性进行了鉴定和评价,得出相对含水率、单株干质量、相对电导率、MDA、K+含量、最大叶长、发芽指数、株高、发芽势、叶绿素含量、蛋白质含量和根系活力等12个指标在NaCl浓度为150 mmol/L时变异系数最大,可作为耐盐性定量鉴定的指标。叶协锋等[14]在种子萌发期选用不同浓度的复合盐碱处理,研究了5个烤烟主栽品


1.2 试验方法

1.2.1 盐胁迫浓度筛选

以K326品种作为筛选NaCl浓度的试验材料。选取均匀饱满的种子,用0.2%高锰酸钾溶液消毒,浸泡30 min后,用去离子水冲洗10次,洗净种子表面残留的高锰酸钾后,在超净台上均匀地点播在MS培养基中。待6 d后从培养基中挑选根长为7~8 mm的烟草幼苗,分别转移到加有50、100、150、200和250 mmol/L NaCl的新MS培养基中;移入新培养基的日期记为第0天,在盐胁迫第5天时测量各处理烟草幼苗根系长度,统计根系伸长值,计算出能够引起根伸长下降50%的NaCl浓度(EC50)[15]。

1.2.2 各品种耐盐性评价

选取均匀、饱满的种子;使用0.2%高锰酸钾溶液消毒,浸泡30 min后,用去离子水冲洗10次,洗净种子表面残留的高锰酸钾后备用。

各品种均设置胁迫处理和对照,每个处理设置3次重复,每重复100粒种子。采用洁净灭菌后的玻璃培养皿、脱脂棉及滤纸,采用1.2.1节中筛选出的最适浓度的NaCl溶液作为培养液进行胁迫培养,以去离子水作为对照培养。在洁净的培养皿中将湿灭菌后的脱脂棉和滤纸用盐溶液和去离子水浸湿后,铺平在培养皿中,在表层滤纸上均匀点播100粒消毒后的种子,在人工气候培养箱(MGC-350BP-2L,上海一恒科学仪器有限公司)中培养。设置光强为4 950 Lx,光照时长为12 h/d,相对湿度60%,温度为26℃。每日定时观察,及时补充去离子水或150 mmol/L NaCl溶液,并统计种子发芽粒数,以胚根超过种子长度的1/2为发芽标准[14]。在培养第14天时,从每个培养皿中随机选出10棵幼苗测量根长。测定指标[14]:


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